Был учеником преподобного Евфросина Псковского (память 15/28 мая). Около 1470 года он основал монастырь во имя святых первоверховных апостолов Петра и Павла на острове Псковского озера, называемом Верхний. Преподобный Досифей имел сан иеромонаха и вероятно был первым игуменом созданной им обители. После многих трудов и подвигов мирно скончался 8 октября 1482 г. Мощи святого почивают под спудом в храме обители.